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莱茵衣藻胞内磷含量对砷耐性的影响研究

2021-03-26 13:55编辑: www.51jrft.com51今日论文网
为了研究莱茵衣藻胞內磷水平对砷耐性的影响,本实验设置两个磷酸盐浓度P1、P2分别为0.315 mg·L-1、3.15 mg·L-1,通过测定莱茵衣藻对砷酸盐(As(V))和亚砷酸盐(As(Ⅲ))两种形态的砷的毒性试验中胞内砷(As)、磷(P)含量,并探究在培养环境中砷浓度[As]dis、胞內砷含量[As]intra、胞內砷磷比[As:P]intra三种数值对莱茵衣藻的砷耐性的影响。结果表明环境中与胞內磷的含量能够影响莱茵衣藻对于砷的耐性,且莱茵衣藻对As(Ⅲ)的耐性要强于As(V);对As(Ⅲ)的耐性,当以[As]dis来表示,磷浓度在P1、P2条件下EC50分别为2.19、24.55 mg-As/L;然而对As(V)耐性,P1条件下EC50为0.58 mg-As/L,P2条件下EC50为9.33 mg-As/L。虽然P浓度增加能在一定程度上增强莱茵衣藻对砷的耐性,但对不同形态As产生影响的程度和机制不同。以[As:P]intra来表示时,对As(Ⅲ)毒性在P1条件下EC50为1.26 mg-As/L,P2条件下为0.85 mg-As/L,,胞內磷含量对于三价砷的影响并不明显;而对于As(V)毒性在P1条件下EC50为1.12 mg-As/L,P2条件下为7.94 mg-As/L,两者相差明显,说明胞內磷对于As(V)毒性的影响要比As(Ⅲ)毒性更明显。但以[As]intra来表示时,发现胞内砷显著影响于莱茵衣藻对As(Ⅲ)的耐性(P1、P2水平下EC50分别为63.09 mg-As/L和208.92 mg-As/L)。
目录
摘要1
关键词1
Abstract1
Key words1
引言2
1材料与方法2
1.1材料及培养条件2
1.2莱茵衣藻的无菌纯化2
1.3莱茵衣藻砷的毒性效应及胞内磷、砷的测定3
1.3.1毒性实验 3
1.3.2莱茵衣藻生长抑制率计算公式 4
1.3.3 As(Ⅲ)和As(V)的毒性实验 4
1.3.4胞内磷的测定 4
1.3.5样品制备 4
1.3.6 P测定 4
1.3.7胞内砷的测定 4
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1.3.8计算EC50 5
2结果与分析5
2.1 As(Ⅲ)对莱茵衣藻的毒性 5
2.2 As(V)对莱茵衣藻的毒性8
2.3 As(V)与As(Ⅲ)对于莱茵衣藻砷耐性的对比11
3讨论 11
3.1胞內磷和环境中的磷对As(V)耐性的影响 11
3.2胞內磷和环境中的磷对As(Ⅲ)耐性的影响 12
致谢12
参考文献13
莱茵衣藻胞内磷含量对砷耐性的影响研究
作者:李颢
引言
1.1材料及培养条件
莱茵衣藻(Chlamydomona reinhardtii)购于中国科学院水生物研究所(中国,武汉)。培养基采用TAP培养基,培养基成分见表1.1,pH为7.0,在121℃下灭菌30min;培养条件:25℃;光照强度为2000 lux,维持光暗比(12h:12h);且在藻种传代扩增及培养过程中均保证无菌操作。
表1.1 TAP培养基配方
Table1.1 Chemical composition of TAP medium
储备液 成分 浓度
Stock Solution(SL) Component Concentration
Tris H2NC(CH2OH)3 2.42 gL1
TAPsalts NH4Cl 0.38 gL1
MgSO47H2O 0.1 gL1
CaCl2H2O 0.05 gL1
磷酸盐 K2HPO4 10.8 mgL1
KH2PO4 5.4 mgL1
微量元素 ZnSO4ž7H2O 0.22 gL1
H3BO3 0.11 gL1
MnCl2ž4H2O 5.06 mgL1
CoCl2ž6H2O 1.61 mgL1
CuSO4ž5H2O 1.57 mgL1
(NH4)6Mo7O24ž4H2O 1.10 mgL1
FeSO4ž7H2O 4.99 mgL1
EDTA 0.5 gL1
醋酸 CH3COOH 1mLL1
实验器材:LabTech ED54智能样品消解仪(北京莱伯泰科公司);Mileston Ethos T微波消解系统;OPTIMA 2100DV 电感耦合等离子体发射光谱仪(美国PerkinElemer公司);高速冷冻离心机;SA10型原子荧光形态分析仪(北京吉天仪器公司);ICPAES(PerkinElmer Optima 2100D)
化学试剂:HNO3、HClO4均为优级纯;(NH4)HPO4、K2S2O8、KBH4、KOH均为分析纯,As元素标准储备液质量浓度为1000μgmL1,介质为1.0 molL1 HNO3;As(Ⅲ)、As(V)、MMA、DMA、标准溶液浓度分别为1.011±0.016、0.233±0.005、0.335±0.011、0.706±0.024μmolL1磷酸氢二铵,过硫酸钾,硼氢化钾、氢氧化钾、硫脲、抗坏血酸均为分析纯,盐酸为优级纯;甲醇为色谱纯。

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