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黄果枸杞类胡萝卜素组成特性的研究

2021-06-03 20:58编辑: www.51jrft.com51今日论文网
枸杞含有丰富的类胡萝卜素。本实验以宁夏黄果和宁杞一号枸杞为原料,以四氢呋喃为溶剂,提取样品中的类胡萝卜素。提取完毕后,利用分光光度计法,测定两种枸杞样品类胡萝卜素总含量。通过建立有效可行的高效液相色谱分析法,定量测定两种枸杞品种不同成熟时期,类胡萝卜素的组成特性及其变化。结果表明本实验所采用的液相方法精密度、重复性、回收率良好;在成熟过程中,宁夏黄果和宁杞一号的类胡萝卜素总量均呈现增加趋势。二者相比,宁杞一号中类胡萝卜素总量在3个不同时期,均明显高于宁夏黄果;HPLC分析结果显示,宁夏黄果在三个时期中,叶黄素和玉米黄素含量呈现出先增大后减小的趋势,而β-胡萝卜素以及玉米黄素棕榈酸酯含量则呈现出持续增加的结果;宁杞一号中叶黄素和玉米黄素棕榈酸酯呈现出明显的减少和增大的趋势;β-胡萝卜素从青果期至成熟前期均呈现含量下降的结果,而在成熟期,含量又有些许回升;玉米黄素变色期含量上升后,又呈现出下降趋势。
目录
摘要3
关键词3
Abstract3
Key words3
引言3
1材料与方法4
1.1 材料与试剂 4
1.2 仪器与设备 4
1.3 实验方法4
1.3.1提取方法4
1.3.2提取溶剂的选择4
1.3.3分光光度计法测定类胡萝卜素总量4
1.3.4高效液相色谱法分析枸杞样品5
2 结果与分析5
2.1提取溶剂的选择5
2.2类胡萝卜素总量测定结果6
2.2.1β胡萝卜素标准工作曲线的绘制6
2.2.2枸杞样品类胡萝卜素总量6
2.3高效液相色谱法分析枸杞样品结果8
2.3.1 HPLC分析方法评价8
2.3.1.1 精密度实验8
2.3.1.2 重复性实验9
2.3.1.3 回收率实验9
2.3.2 类胡萝卜素纯品标准工作曲线的绘制9
2.3.3 枸杞样品HPLC结果分析10
3 讨论14
3.1提取方法和提取溶剂的选择14
3.2分光光度计法测定类胡萝卜素总量14 *51今日免费论文网|www.51jrft.com +Q: @351916072

3.3高效液相色谱法分析枸杞样品14
3.4总结15
致谢15
参考文献16
黄果枸杞类胡萝卜素组成特性的研究
引言
对枸杞的研究,可追溯至上世纪50年代。早期文献更多地着眼于枸杞在医学、药学方面的积极作用,并且研究目标多为实现枸杞良好的栽培、繁育、采收等效果。这些都为对枸杞的进一步探索奠定了稳定的基础。随着研究的发展,枸杞对人体可产生有益作用的功能活性也逐渐为科学工作者所熟知,其可滋补提神、增强体质,有着润肺清肝明目等功效。经测定,已确定枸杞中含有多糖、氨基酸、类胡萝卜素、VB1、VB2、VC、VE、甜菜碱、亚油酸等成分[1]。其中,类胡萝卜素一方面为人体所必须的维生素A的前体物质,另一方面更是起到预防疾病、提高机体免疫力等作用[2]。而枸杞中类胡萝卜素含量丰富,是类胡萝卜素含量最高的植物之一[3]。
黄果枸杞属宁夏枸杞变种,具有传统药用价值。与其他大部分文献选择红枸杞作为实验原料不同,本实验旨在研究宁夏黄果枸杞中类胡萝卜素的组成特性,包括其类胡萝卜素总量的定量测定、不同成熟时期类胡萝卜素的含量和组成的变化等,并与宁杞一号红枸杞相应的特性进行分析比对,从而更好地指导后续研究甚至加工生产。实验主要涉及的内容包括对枸杞鲜果的前处理、对更佳的类胡萝卜素提取方法的探索、分光光度计法对类胡萝卜素总量的测定以及建立有效的高效液相色谱方法,对枸杞中类胡萝卜素的组成特性进行定量、准确的分析。通过本实验,为黄果枸杞中活性成分的开发提供了指导,并且为揭示枸杞成熟过程中的生理生化反应打下了基础。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
宁夏黄果枸杞、宁杞一号枸杞 产于宁夏,80℃保存;β胡萝卜素、叶黄素、玉米黄素、玉米黄素棕榈酸酯 瑞士 CaroteNatute;甲醇(色谱级) Avantor Performance Materials Sdn Bhd;甲基叔丁基醚(色谱级) Shanghai Macklin Biochemical Co., Ltd.;水,为超纯水;四氢呋喃、石油醚、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷、乙酸铵 均为国产分析纯。
1.2 仪器与设备
紫外可见分光光度计 上海菁华科技仪器有限公司;分析天平 上海康路仪器设备有限公司;超声波细胞破碎机 无锡沃信仪器制造有限公司;高速离心机 长沙湘智离心机仪器公司;OSB2100旋蒸仪 上海爱朗仪器有限公司;CCA20低温冷却水循环泵 巩义市予华仪器有限责任公司;紫外分光光度计 山东畅欧商贸有限公司;高效液相色谱仪器 日本岛津公司;YMCC30色谱柱(4.6×250 mm,5 μm) 日本YMC公司。
1.3 实验方法
1.3.1 提取方法
采用有机溶剂浸提法提取枸杞鲜果中的类胡萝卜素,枸杞鲜果加液氮充分研磨后,称取1g左右样品于玻璃离心管中,以料液比1:15加入提取溶剂,封口,利用细胞破碎机破碎2030min,期间保证玻璃离心管置于冰浴中,且适时补冰,防止管内温度迅速上升。转移提取液于塑料离心管中,离心10min,取上清液,并记录其体积。所得提取液避光保存于18℃。
1.3.2 提取溶剂的选择
以宁杞一号干果样品为原料,称取研磨后的样品约0.5g,按上述提取方法,比较石油醚:丙酮=1:1、乙酸乙酯:丙酮=1:1、四氢呋喃三种提取溶剂的提取效果。
1.3.3 分光光度计法测定类胡萝卜素总量
利用β胡萝卜素纯品进行全波长扫描显示,其最大吸收波长为450nm,如图1。配制浓度梯度为0、0.2、0.4、0.6、0.8和1.0μg/mL的β胡萝卜素标准溶液,测定其在450nm处的吸光度,绘制β胡萝卜素标准曲线。对样品提取液进行适当处理后,同样测定其在450nm处的吸光度,计算样品类胡萝卜素总量。

1.3.4 高效液相色谱法分析枸杞样品
采用梯度洗脱的方法进行分析,总时长为75min,具体设置为:0min时:80%流动相A相,20%流动相B相;55min时:0%流动相A相,100%流动相B相;60min:0%流动相A相,100%流动相B相;65min时:80%流动相A相,20%流动相B相;70min时:80%流动相A相,20%流动相B相。其中,流动相A为:80%甲醇,20%水和0.4g/L 乙酸铵;流动相B为:20%甲醇,78%甲基叔丁基醚,2%水和0.4g/L乙酸铵。检测波长为450nm,柱温设置为35℃,进样量20μL。
2 结果与分析
2.1 提取溶剂的选择
利用宁杞一号枸杞为原料,比较石油醚:丙酮=1:1、乙酸乙酯:丙酮=1:1、四氢呋喃三种提取溶剂的提取效果。对上述三种选择方案,分别设置三组平行实验,样品称取量见表1。

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